干細(xì)胞基因治療實驗室不同功能區(qū)的潔凈等級如何匹配

干細(xì)胞基因治療實驗室不同功能區(qū)潔凈等級匹配原則

適用區(qū)域：細(xì)胞無菌接種、基因編輯（如 CRISPR）、制劑灌裝、凍存前分裝工位。

潔凈等級要求：操作臺面為局部 A 級（ISO 4 級），采用垂直單向流罩 / 隔離器，風(fēng)速 0.3~0.5m/s，懸浮粒子≤35 粒 /m3（≥0.5μm）；周邊環(huán)境為B 級背景（ISO 5 級），亂流凈化，換氣次數(shù)≥50 次 /h。

匹配邏輯：保障細(xì)胞與載體的無菌狀態(tài)，避免微生物污染導(dǎo)致實驗失敗；局部 A 級替代全室 A 級，節(jié)省空間與成本。

2、細(xì)胞培養(yǎng)擴增區(qū)：B 級

適用區(qū)域：干細(xì)胞擴增、病毒載體包裝、細(xì)胞誘導(dǎo)分化間。

潔凈等級要求：B 級（ISO 5 級），維持正壓環(huán)境，相對相鄰低潔凈區(qū)壓差≥5Pa，懸浮粒子≤352 粒 /m3（≥0.5μm），沉降菌≤1cfu / 皿?4h。

匹配邏輯：細(xì)胞培養(yǎng)周期長，需穩(wěn)定無菌環(huán)境；正壓可防止外部污染侵入，適配規(guī)模化培養(yǎng)需求。

3、陽性對照 / 病毒操作區(qū)：B 級 + 負(fù)壓隔離

適用區(qū)域：陽性菌株培養(yǎng)、高致病性病毒載體操作、基因編輯陽性細(xì)胞驗證間。

潔凈等級要求：基礎(chǔ)環(huán)境為B 級，但需維持相對周邊區(qū)域 - 10~-15Pa 負(fù)壓，獨立排風(fēng)經(jīng)兩級 HEPA 過濾；操作需在生物安全柜（BSL-2 級及以上）內(nèi)進(jìn)行。

匹配邏輯：負(fù)壓強制氣流單向流入，防止陽性污染物外泄；B 級背景保障實驗操作的無菌性，兼顧安全與實驗需求。

4、物料處理 / 更衣緩沖區(qū)：C 級～D 級

無菌物料暫存間：C 級（ISO 7 級），換氣次數(shù)≥25 次 /h；

更衣 / 脫外包間：D 級（ISO 8 級），換氣次數(shù)≥15 次 /h，與潔凈區(qū)形成壓差梯度（C 級＞D 級＞非潔凈區(qū)）。

適用區(qū)域：物料脫外包、滅菌后暫存、一更 / 二更緩沖間。

5、潔凈等級要求：

匹配邏輯：作為潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)的過渡，降低污染帶入風(fēng)險；分級匹配物料清潔程度，避免過度凈化造成浪費。

適用區(qū)域：廢料滅菌、暫存、轉(zhuǎn)運間。

潔凈等級要求：D 級，維持相對核心區(qū) -5~-8Pa 負(fù)壓，獨立排風(fēng)經(jīng) HEPA 過濾；地面墻面需耐消毒、防滲漏。

匹配邏輯：負(fù)壓防止廢料氣溶膠擴散，D 級滿足基本清潔需求，無需高等級凈化。

6、輔助功能區(qū)：非潔凈級

適用區(qū)域：辦公區(qū)、QC 檢測區(qū)（非無菌項目）、冷庫（非無菌物料）。

潔凈等級要求：常規(guī)實驗室環(huán)境，無需受控潔凈等級，但需與潔凈區(qū)物理隔斷，通過緩沖間連通。

匹配邏輯：非無菌操作無需潔凈環(huán)境，降低建設(shè)與運行成本。